western-blot化学发光（ECL）的特异性差怎么办

特异性差，杂带或非特异条带可能有以下原因：

1. 蛋白质上样量过大。可以减少蛋白质上样量。

2. 一抗是多克隆抗体，或者一抗和二抗浓度过高。可用单克隆抗体代替，或降低抗体浓度，缩短抗体孵化时间，优化一抗和二抗的使用浓度。

3. 洗膜不足。可增加洗膜次数和buffer用量，延长洗膜时间或Wash 最终浓度为0.05%的Twen-20添加到Buffer中。

4. 目的蛋白在体内有多种修饰形式，如乙酰化、甲基化、磷酸化、糖基化等。您可以查阅文献，以适当的方式去除蛋白质修饰，或选择适当的抗体。

5. 蛋白质降解的目的。重新准备蛋白质样品，并添加足够的蛋白酶抑制剂。

6. ECL发光液质量问题，如Enlight，可选用发光清晰的ECL发光液。