northern blot原理示意图
一、原理：在变性条件下，将待检查的RNA样品用琼脂糖凝胶电泳，然后将凝胶中的位置转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上，然后与同位素或其他标记物标记的RNA探针反应。
- 用途：检测样品中是否含有基因转录产物（mRNA）及其含量。
二、仪器和试剂
- 仪器： 恒温水浴箱、电泳仪、凝胶成像系统、真空转移仪、真空泵、UV交联仪、杂交炉、恒温摇床、脱色摇床、涡旋振荡器、分光光度计、微量移液器、电炉(或微波炉)、离心管、烧杯、量筒、三角瓶等。
- 材料： 总RNA样品或MRNA样品，DNA探针模板(25 ng)，尼龙膜
- 试剂：NorthernMax Kit（Cat. # 1940，Ambion, Inc.），琼脂糖，DEPC, x光底片，底片暗盒，Random Primer， dNTP Mixture，111 TBq/mmol[a-32P]dCTP，Exo-free Klenow Fragment和10 X Buffer, Sephadex G-50,SDS，过氧化氢、灭菌水等。
