第一代测序sanger法测序又称双脱氧法测序
双脱氧测序方法速度快。引物的复性和测序可在60~90之间 min 内部完成。可同时制备大量单链或双链测序样品。如果使用35 DNTP标有S标记 测序，可以提供优异的(电泳)条带分辨率。其主要缺点是模板的组成或二次结构有时会导致测序过早终止。虽然和Klenow 与片段相比，还有其他聚合酶可以缓解这个问题，但有些DNA 无法用双脱氧法准确测量序列。
化学法的主要优点是可以消除DNA 合成DNA的聚合酶 当遇到问题时，可以测量酶法无法测量的序列。此外，对于较短的DNA， 化学法不需要将其亚克隆到合适的测序载体上进行片段测序。最后，化学法是确定小分子质量寡核苷酸序列的唯一方法。虽然DNA准备用于测序 开发PSP64CS、PSP655等特殊载体需要很多时间，但现在需要很多时间 CS ，亚克隆相邻待测序列的片段可以直接标记，未确定的单链末端可以标记，消除需要大量擦拭时间的胶水纯化步骤。这些载体的应用也实现了同时测序大量样品的目标，因为每个重组质粒的测序都是系统的。
