Western-blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很弱是什么原因？

条带弱的原因可能有以下几个:

①. 由于来源组织或细胞中蛋白质上样量低或目的蛋白质表达不丰富。可以适当增加蛋白质上样量，也可以通过提高抗体稀释度或使用更灵敏度的发光底物来调整，如英格恩的Enlight-plus。

②. 蛋白质没有完全转移到膜上。转膜后，可以通过预染Marker判断转膜效率，也可以通过丽春红染膜和考马斯亮蓝染胶判断转膜效率。

③. 抗体效率低，剂量不足，孵化时间短，或抗体反复使用和保存不当。可以考虑更换更有效的抗体，或提高抗体稀释度，延长抗体孵化时间；如果怀疑抗体失活，可以使用斑点杂交实验来确定抗体活性。

④. 曝光时间过短。曝光时间可适当延长。