原理：Trizol试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。Trizol可以在样品裂解或匀浆过程中保持RNA的完整性。加入氯仿后离心，样品分为水样层和有机层。水样层中存在RNA。收集上述水样层后，RNA可通过异丙醇沉淀恢复。去除水样层后，样品中的DNA和蛋白质也可以以沉淀的形式相继恢复。乙醇沉淀能沉淀中间层的DNA，在有机层中加入异丙醇能沉淀有机层的蛋白质。共纯化DNA对样品间标准化RNA的产量非常有用。
Trizol试剂可用于小样本(50~100mg组织，50~100mg组织，×106细胞)，也可用于大量样品（≥1g组织或≥107细胞)适用于人、动物、植物、细菌和血液提取，可同时处理大量不同样品。反应可在一小时内完成。提取的总RNA无DNA和蛋白质污染，可用于Northern blot、RT-PCR、Dot blot、RNase保护分析等。
该试剂为红色，便于区分水相和有机相，同时最大限度地保持RNA的完整性。
保存条件：2~8℃避光12个月。
试验前需要准备的试剂：
Trizol，氯仿，异丙醇，75%乙醇(RNase-Freee水)，RNase-Free水。
实验前需要准备的物品：
1ml注射器，1.5ml EP管(DEPC处理)，大、中、小号枪头(DEPC处理)
样品预处理注意事项：
- 新鲜血液的选择不得超过4小时。
- 选择新鲜组织，成长旺盛的组织。
- 选择新鲜的幼嫩组织。
- 选择在生长旺盛的时期收集细胞。
RNA纯化要求：
- 纯化后不应有抑制酶（如逆转录酶）的物质。
- 排除有机溶剂和金属离子的污染。
- 最大限度地减少对蛋白质、多糖和脂类分子的污染。
- 排除DNA分子污染。
RNA提取注意事项：
- 消除外源酶污染。
- 严格戴口罩、手套。
- 对离心管、Tip头、移液器杆、电泳池、实验台等进行彻底处理。
- 必须确保RNaseee所涉及的试剂/溶液，特别是水-Free。
- 阻止内源酶的活性。
- 选择合适的均浆方法。
- 选择合适的裂解液。
- 控制样品的起始量。
- 明确自己的提取目的。
- 当样品最大起始量接近时，任何裂解液系统的提取成功率都急剧下降。
- RNA提取成功的唯一经济标准是后续实验的成功，而不是得率。
Rnase污染的十大来源
- 手指头
- 枪头
- 水/缓冲液
- 实验台面
- 内源Rnase
- RNA样品
- 质粒提取
- RNA保存
- 阳离子（Ca，Mg）
- 后续实验中使用的酶
