RNA细胞转染实验影响因素

2024年11月28日 阅读量:200
  1. 转染试剂

转染中应特别注意的是,转染试剂应确认无RNase污染,并尽量避免和避免质粒DNA转染混用-即使试剂本身与DNA和RNA相兼容,由于RNA和DNA的尺寸不同,转染条件也不同,因此RNA专用转染试剂会更好。例如,Entranster-R400.

  1. RNA转染时RNA的用量

RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明RNA和转染试剂的比例决定了转染复合物的结构和净电荷,以及它们是否容易被细胞膜吸附和吞咽。RNA不太好,太多会有毒问题。

  1. RNA本身的结构

除了操作,RNA本身的结构也对感染有一定的影响。哺乳动物的MRNA分子有5端帽子结构和3端PolyA尾巴,除了IRES(internal ribosomal entry site)这些结构可能有助于提高MRNA的稳定性,也可能有助于将核糖体结合到MRNA上进行翻译。

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