- 转染试剂
转染中应特别注意的是,转染试剂应确认无RNase污染,并尽量避免和避免质粒DNA转染混用-即使试剂本身与DNA和RNA相兼容,由于RNA和DNA的尺寸不同,转染条件也不同,因此RNA专用转染试剂会更好。例如,Entranster-R400.
- RNA转染时RNA的用量
RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明RNA和转染试剂的比例决定了转染复合物的结构和净电荷,以及它们是否容易被细胞膜吸附和吞咽。RNA不太好,太多会有毒问题。
- RNA本身的结构
除了操作,RNA本身的结构也对感染有一定的影响。哺乳动物的MRNA分子有5端帽子结构和3端PolyA尾巴,除了IRES(internal ribosomal entry site)这些结构可能有助于提高MRNA的稳定性,也可能有助于将核糖体结合到MRNA上进行翻译。


