细胞在基质凝胶中的培养

基质凝胶培养是研究细胞与细胞、细胞与基质相互作用的重要方法，如细胞运动性和肿瘤细胞的侵袭转移能力。目前应用最广泛的凝胶是I 鼠尾胶原蛋白、纤维蛋白胶原蛋白、血浆胶原蛋白等。

(一)材料和设备

胶原凝胶I (collagen I) 、完全培养液、培养皿(直径35mm)、吸管，移液枪，CO₂ 培养箱。

(二)操作步骤

1．胶原凝胶的浓度为2.0mg/ml, 充分混匀。
2. 在培养皿中加入1ml 以上凝胶培养液，保证培养皿底部覆盖均匀。
3. 放置CO₂ 培养箱15min， 凝胶凝固。
4. 加入2ml水化凝胶和水化凝胶 完全培养液， CO₂培养箱孵化10个 min 。
5 . 小心吸出培养液，避免凝胶破裂。
6. 加2ml 细胞悬液(0.5 X 10⁶~1X 10⁶ 个/ml) 于凝胶上， CO₂ 继续在培养箱中培养。

(三)注意事项

1.凝胶的浓度应根据细胞本身的特性确定，一般为1.5~3mg/ml 。
2. 保证凝胶完全覆盖培养瓶(容器)底部，厚度为1 ~2mm。
3. 凝胶水化后容易破裂，应小心吸出水化液。
4. 细胞可以铺在固化的凝胶上，也可以与液体胶原凝胶培养液混合，然后接种到培养皿中。

（四）小结

体外研究肿瘤细胞血管拟态， 在三维培养的帮助下。垃圾胶三维培养中，内皮细胞会形成血管网。