关于细胞培养基你需要知道的那些事

2024年12月03日 阅读量:115


大多数实验室购买的培养基是预处理的瓶装液体培养基,或需要水化和过滤干粉的培养基。后者更便宜,更有价值。

因为培养基中有酚红或其他染料 虽然指示剂看起来都差不多,但实际上它们并不一样,所以千万不要用错。

用酚红pH指示剂添加培养基的颜色

pH6.5 以下是柠檬黄

pH6.5 为黄色

pH7.0 为橙色

pH7.4 为红色

pH7.6 为粉红

pH7.8 为紫色

大多数细胞最适合pH 为7.4 左右。

微黄的培养基是酸性的,说明:

(1)细胞过度生长;  (2)细菌污染;   (3)培养箱浓度仅过高

紫色培养基为碱性,说明:

(1)细胞生长非常缓慢,甚至没有生长;   (2)霉菌污染;   (3)培养箱CO2的浓度过低

在准备培养基时,一些细胞需要添加其他成分,L -谷氨酰胺是最常见的补充剂,很快就会耗尽。这些添加剂可以用来过滤细菌,然后添加到培养基中,也可以用分装的储存溶液溶解。

细胞培养基中有许多热不稳定的成分,必须在低温下保存,但培养基必须在接触细胞前提前预热到37℃,不要在细胞中添加冷培养基。由于培养基中的许多成分对热不稳定,如37’中的抗生素C 半衰期很短,所以培养基不能一直放在37"C, 最好只使用10个培养基 分钟前预热,取出多少培养基。

最好买500 ml 瓶装培养基或5000 ml 在瓶内准备培养基。如果你每周使用5000,如果你每周使用5000 ml 使用前加入血清等不稳定试剂的培养基。但是要注意先吸出适量的培养基,这样加入其他成分后的最终体积还是500 ml 。(如果要加10 %的血清和5 ml 抗生素,用试剂瓶配445 ml 在血清和分装抗生素中加入培养基。)

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