如何能达到较高的细胞转染效率？

1．选择合适的转染试剂
      不同细胞系的感染效率通常不同，但细胞系的选择通常是基于实验的需要，因此在感染实验前应根据实验要求和细胞特性选择合适的感染试剂。每种转染试剂都会提供一些成功的细胞株列表和文献，最适合实验设计的转染试剂可以通过这些数据进行选择。当然，高效、低毒、方便、廉价的转染试剂是最合适的。Entranster试剂，如英格恩的纳米材料。
2．保持细胞的最佳状态
      细胞代数一般较低（<50)能保证基因型不变。最适合转染的细胞是经过几次代代后达到指数生长期的细胞，细胞生长旺盛，最容易转染。在实验室中保存几个月和几年后，细胞培养会经历突变、总染色体重组或基因调节的变化。这将导致与转染相关的细胞行为的变化。也就是说，在不同实验室的不同培养条件下，同一系的细胞株的生物学性质发生了不同程度的变化，导致其传染性特征也发生了变化。因此，如果发现转染效率降低，可以尝试转染新鲜培养的细胞，以恢复最佳效果。
3．选择高效的转染方法
      不同的感染试剂有不同的感染方法，但大多数都是相似的。感染应遵循具体的感染试剂推荐的方法，但也应注意，由于不同实验室培养的细胞性质、质粒定量、操作方法等，其感染效果可能不同，最佳感染条件应根据实验室的具体情况确定。
4．确保所建载体的质量。
      构建转染载体(病毒载体，质粒DNA，RNA，PCR产品、寡核苷酸等。)也会影响感染结果。病毒载体对特定宿主细胞的感染效率较高，但不同的病毒载体有其特定的宿主，有些还需要特定的细胞周期，如逆转录病毒需要感染分裂期的宿主细胞，并考虑一些安全问题（如基因污染）。除了载体结构外，载体的形状和尺寸对感染效率也有不同的影响，如上述超螺旋和线性DNA对瞬时和稳定感染的影响。如果基因产物对细胞有毒作用，就很难进行感染。因此，选择组成或可调节的启动子也非常重要。同时，空载体和其他基因相同载体的感染可以消除毒性影响的干扰。