化学词典告诉你吡罗红的染色原理和准备方法。吡罗红，英文名为Xanthylium，3，6-bis(dimethylamino)-, chloride，C17H19ClN2O分子式。又称派洛宁G，吡罗红使RNA呈红色，常用于检测细胞中RNA的分布，常与甲基绿混合，即甲基绿派洛宁（methyl green-pyronin），碱性染料可与细胞内的DNA一起使用、RNA结合呈现不同的颜色。
吡罗红染色原理
即吡罗红G，又称派洛宁G，吡罗红使RNA变红，常用于检测细胞中RNA的分布，常与甲基绿混合，即甲基绿-派洛宁（methyl green-pyronin），碱性染料可与细胞内的DNA一起使用、RNA结合呈现不同的颜色。当甲基绿和派洛宁作为混合染料时，DNA在甲基绿和染色质中的选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁和细胞质中RNA的选择性结合显示红色。原因可能是两种染料的混合染料具有竞争力，两种核酸分子是多聚体，聚合程度不同。甲基绿易与高度聚合的DNA结合呈绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈红色(但解聚的DNA也可与派洛宁结合呈红色)。也就是说，RNA对派洛宁有很大的亲和力，染成红色，而DNA对甲基绿有很大的亲和力，染成绿色。
吡罗红配制方法
①染色剂A液的两种制备方法
第一种方法：取吡罗红甲基绿粉1 g，加入到100 将ml蒸馏水溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。
第二种方法：取甲基绿2 g溶于98 在ml蒸馏水中取吡罗红G 5 g溶于95 在ml蒸馏水中。取6 ml甲基绿溶液和2 加入16ml吡罗红溶液 ml蒸馏水，即A液，放入棕色瓶中备用。(注:吡罗红G用于核酸染色，请不要误买吡罗红B。)
②染色剂B液的制备方法 B液是由乙酸钠和乙酸混合而成的缓冲液。先取乙酸钠16.4 g，用蒸馏水溶解至1 000 ml备用；乙酸12 mL，用蒸馏水稀释至1 000 毫升备用。取准备好的乙酸钠溶液30 稀释乙酸20ml和稀释乙酸 mL，加蒸馏水50 mL，B液(缓冲液)，pH为4.8。
③制备染色剂 染色剂由A液和B液混合制成。取A液20 mL和B液80 ml混合是实验中使用的吡罗红甲基绿色染色剂。应注意的是，试剂应现在使用。
