
RNA干扰(RNAi),即使使用20多个核苷 由短双链RNA组成的酸(siRNA)转录后取代传统反义核酸的基因沉默,已迅速广泛应用于基因功能、基因表达控制机制研究等热点领域,是基因 治疗开辟了新的途径。近两年来,这方面的科学论文和报道爆炸性增长,几乎每天都有新的结果。在这些论文中,有许多与RNA干扰相关的概念,其含义非常相关 这里列出了几个常见的RNA干扰术语及其简单的解释:
1、 miRNA:在遗传学中,微 RNA(microRNAs,miRNA)单链RNA片段长度在21-23个核苷酸之间, 调整基因的表达。MiRNA由基因编码,从DNA转录, 但不翻译成蛋白质。初级转录产品(primary transcripts,pri-miRNA)缩短颈环结构,获得功能性miRNA。成熟的MIRNA分子与一个或多个MRNA分子互补,主要是 功能是降低基因的表达。MicroRNA这个概念在2001年首次出现在Science上 (26 October 出现在2001年的文章中。
2、 dsRNA: 双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)它是一种具有互补链的RNA,类似于细胞中发现的DNA。DSRNA构成了一些病毒(双链RNA病毒)的基因组。如病毒RNA或SiRNA 双链RNA能促进真核细胞中的RNA干扰,引起脊椎动物中的干扰素反应。
3、 shRNA:小发卡或短发卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)它是一个紧密的发卡环(tight hairpin turn)RNA序列常用于RNA干扰沉默靶基因的表达。使用载体将ShRNA导入细胞,载体中的U6 启动子确保ShRNA始终表达;这种装载ShRNA的载体可以传递到子代细胞,使基因沉默可以遗传。细胞机制可以将shRNA的发卡结构切割成 siRNA,然后将SiRNA与RNA结合,诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),该复合物可与目的MRNAS结合并降解。shRNA 是由RNA 聚合酶Ⅲ哺乳细胞中的SHRNA产物有时会促进干扰素反应(病毒侵袭时细胞的自卫反应),但MIRNA不会遇到这个问题 (MiRNA是RNA聚合酶Ⅱ转录与转录MRNA的聚合酶相同)。在这些系统中,不需要U6启动子的驱动,也用于植物和其他系统。在植物 CaMV35S是常用的增强表达启动子(cauliflower mosaic virus RNA聚合酶35S),在这种情况下ⅡRNA干扰从转录开始。
4、 siRNA:干扰RNA的小或短(small/short interfering RNA, siRNA)它是一种核苷酸长度为20-25的双链RNA分子,主要作用于RNAI通道,干扰特异基因的表达。此外,SiRNA在RNAI相关通道中 抗病毒机制、基因组染色体结构塑造等也起作用。它的结构是一个完全互补的RNA双链,两端各有两个未互补的碱基。
最后做一个总结,miRNA,siRNA,DSRNA和SHRNA都是RNA干扰技术中使用的小分子RNA,其区别在于MIRNA 是单链RNA,其余都是双链RNA;siRNA类似于dsRNA;shRNA需要通过载体导入细胞,然后利用细胞内的酶切机制得到siRNA,最终发挥作用 RNA干扰作用。

