分子实验什么时候需要无菌操作?

2023年07月27日 阅读量:114

无菌技术什么时候使用?

必须进行无菌操作时,必须进行无菌操作。无论何时进行生活有机体实验或为生活实验准备培养基、缓冲液、培养容器等,都必须采用无菌操作技术,如:

· 准备转化的大肠杆菌培养物
· 制备LB 平板培养基
· 分装细胞
· 过滤培养基的血清
· 打开和溶解冻干细菌

无菌操作有帮助的情况下。如果您不希望容器或区域中的物质进入另一个容器或区域,则应使用无菌操作。无菌操作适用于实验室中的许多操作,即使在操作高盐和/或者当去污剂等缓冲液不会生长细菌时,也要小心不要将手或移液头上的油脂和灰尘混入溶液中。

操作有害制剂时,如放射性物质或有毒物质,应使用无菌操作。首先是保护自己。有时你必须改变一些实验操作过程,在你和试剂之间建立一个屏障,既能保护自己,又能保护试剂,例如:


· 限制性酶切反应。虽然大多数酶保存在甘油中,但限制性酶的污染是一场巨大的灾难,甘油浓度大于50 %细菌通常不会生长,但在稀释酶和不参与甘油的操作中有潜在污染的可能性,微量常见元素的污染也会抑制酶的活性。

· 进行PCR 反应。PCR 其他DNA在反应中 混合会导致灾难性后果。PCR 无菌操作技术应用于反应,无PCR 仪器或PCR 反应产物分析室的操作可以避免偶尔的DNA 污染。

· 利用32P 用磷酸盐标记细胞。在这种情况下,无菌操作技术的使用是为了保护自己,而不是为了保护细胞。出于无菌考虑,盖子不应始终打开,不应产生雾,也不应使用已使用的液体移动管。

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