骨质疏松症是最常见的骨骼疾病之一，严重影响老年人的健康和生活质量。成骨细胞分化和骨形成的减少导致骨量和微结构的变化，使骨骼容易骨折。佛手柑素（BM）它是一种天然化合物，来自各种柑橘类水果，具有多种生物活性，包括抗脂肪生成功能。
佛手柑素结构式
发表于2022年1月30日，Food &Function的一篇题为Bergamottin promotes osteoblast differentiation and bone formationvia activating the Wnt/β-catenin signaling pathway 本文证明，BM作为成骨的正调节剂，能显著促进成骨细胞的分化和形成。BM在机制上激活Wnt//β-catenin信号通路促进β-catenin的核转位。此外，BM得到了极大的改善β-catenin的表达增强了T细胞因子7(TCF7)的转录激活，增加了Runt相关转录因子2(Runx2)的表达。总之，这项研究表明，BM可以增强成骨细胞的分化，削弱卵巢切除术（OVX）骨质流失可发展成食品成分或补充剂，以预防骨质疏松症。
研究人员在实验过程中使用DNA转染试剂的用量方法与lipo2000相同，进行了细胞转染实验，重要的是，含血清培养基可用于转染，不需要在血清和无血清之间更换，以增加工作量。同时，血清转染不仅不会引起细胞毒性，而且有利于维持细胞状态，提高转染效率。
通过大量的实验，研究人员最终得出以下结论：
1. BM增加成骨基因的表达，促进成骨细胞的分化
研究人员用不同浓度的BM处理MC3T3-E1细胞，研究BM对成骨细胞的细胞毒性。结果表明，BM低于100μM的浓度对MC3T3-E1细胞没有明显的细胞毒性。ALP活性检测显示，BM通过剂量依赖增强了ALP活性。接触BM后，包括Alp、Col-1、成骨标记基因的MRNA水平明显增加，包括Runx2和Ocn，特别是在20年μ在M剂量下。此外，BM处理后，成骨细胞的ALP染色强度和基质矿化也得到了显著提升。这些结果表明，BM促进成骨细胞的分化，增加成骨基因的表达。
2. BM调整Wnt/Wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白表达
Wnt/β-catenin信号通路在成骨细胞分化中起着关键作用。实验数据显示，BM通过增加LRP6、Wnt3a和β-catenin的表达和GSK-3的减少βWnt//Wnt/β-调整catenin途径起着重要作用。
3. BM促使β-catenin核转位并激活下游信号转移
首先，与对照组相比，BM(20μM）在存在的情况下，发现β-catenin(红色染色)在细胞核中显著增加。此外，用20μM的BM处理后，β-catenin在细胞核中的表达明显增加，而在细胞质中的表达却没有明显改变。在BM（20μM）在处理组中，TCF7的转录活动急剧增强。另外，TCF4经BM处理后、特别是在20年，TCF7和Runx2的表达增加了，μM时。结果表明，BM激活了成骨细胞中的Wnt/β-catenin信号，这可能与其对成骨细胞分化的积极调节密切相关。
4. BM过氧化氢的恢复（H2O2）成骨细胞分化的抑制作用
H2O2它可以通过引起氧化应激抑制骨细胞的分化，从而诱发细胞衰老。这里的研究人员进一步评估了BM对H的评价2O2细胞衰老导致成骨细胞分化减弱的影响。实验数据显示，BM通过剂量依赖改善了H2O2抑制成骨细胞分化引起的细胞衰老。
5. BM保护OVX诱导的骨质流失
采用OVX诱导的骨质疏松小鼠模型，进一步研究BM对体内骨质疏松的治疗效果。结果表明，BM可以成为治疗骨质疏松症的有前途的治疗剂。
简而言之，本研究澄清了BM通过激活Wnt//β-catenin信号通道促进骨细胞分化，恢复骨细胞分化功能，抑制OVX引起的骨质流失。这些发现证明，BM可能被发展成治疗骨质疏松症的食品成分或食品补充剂。
