做Western Blot发光实验中经常出现“背景过高”的问题。要找出“背景过高”的原因，首先要知道“背景”是什么，“背景”也是发光，影响发光的因素会影响背景。
影响发光的主要因素有:1。含HRP的抗体；2.发光试剂；3.与发光试剂反应的杂质，如含有杂质的薄膜。其中，短时间内曝光引起的背景主要是由含有HRP的抗体因素引起的。抗体浓度过高、洗涤不足、密封不足会导致膜上抗体的非特殊组合和背景；转移膜包括最终曝光时包裹的塑料薄膜，杂质也会产生背景，更容易发现和识别。
值得注意的是，如果发光试剂不好，也会产生背景，这在长期曝光的情况下是显而易见的。有些人做过实验。在长期曝光（超过30分钟）下，高质量的发光试剂背景明显低于普通的发光试剂背景，图像更美观，结果更可靠。
对于一些实验，如果实验结果应该是多条带，但有些带可以在短时间内检测，因为蛋白质量相对较少，需要长时间曝光。此时，主要影响因素是发光试剂，因为如果抗体量增加，普通发光试剂的背景也会相应增加，影响弱条带的检测。如果抗体量减少，普通发光试剂较弱条带不易检测，长期曝光也隐藏在背景中。此时，如果不知道有弱条带，实验结论实际上会受到发光试剂的影响。此时，如果你不知道有弱条带，实验结论实际上会受到发光试剂的影响。如果有长期曝光和低背景的发光试剂，结果将非常可靠。
因此，采用优质的发光试剂，可以减少背景，获得美观、真实、可靠的发光效果。
EnlightTM发光液含有精确的发光底物，提高信噪比110倍以上，背景灵敏度较高，但背景较低。
