一、什么是抗体?
抗体是一些淋巴细胞直接抵抗外来分子产生的蛋白质,它们是免疫系统的重要组成部分,也是实验室的重要工具。
多克隆抗体它是由抗原注射动物产生的各种免疫球蛋白的混合物,由不同的抗原决定簇直接产生相同蛋白质的不同亲和力。
单克隆抗体它是在体外制备的,是由免疫淋巴瘤细胞与分泌抗体的浆细胞融合而产生的。整个培养只产生一种抗体(通常是IGG) ,直接抵抗外来物。
二、抗体的作用
抗体可以用放射性元素或酶标记,使它们识别的蛋白质可见或定量。
- 染色细胞。标记抗体可用于定位细胞蛋白。
- 免疫浏览。抗体可用于检测抗原是否存在及其功能。
表一 免疫化学技术、多克隆抗体和单克隆抗体
| 技术 | 多克隆抗体 | 单克隆抗体 | 单克隆抗体共聚 |
| 细胞染色 免疫共沉淀 免疫印迹 亲和纯化免疫 | 一般好 一般好 一般好 差 | 抗体依赖 抗体依赖 抗体依赖 抗体依赖 | 很好 很好 很好 差 |
| 免疫方法 | |||
| 标记抗体 标记抗原 | 困难 一般好 | 好 抗体依赖 | 很好 很好 |
- 免疫印记。我们所知道的免疫印记法是蛋白质的存在和数量可以通过滤膜上的样品免疫检测到。
- 免疫亲和力。抗体针对的蛋白质可以直接分离和纯化。
三、储存抗体
- 抗体最好储存在-20℃分装,冻融对大多数抗体都不好。
- 分装抗体可在4℃下保存至少6个月。
- 叠氮钠的最终浓度为0.02%防止细菌生长。
四、温馨提示
- 你应该知道你的抗体是由什么动物产生的,并决定使用什么样的二次抗体。多克隆抗体通常使用兔子或猴子,单克隆抗体通常使用小鼠、大鼠和仓鼠。
- 使用前离心去除所有沉淀,在某些操作中可防止高背景。
- A蛋白,从S. aureus 分离在细胞壁中的42 kda多肽;G 蛋白,从β溶血链球菌中分离的30-35 kDa 多肽与抗体强烈结合,用于免疫沉淀或定位抗体。A蛋自和G蛋白可以与珠子结合或标记,适用于大多数抗体亚类。

