细胞转染实验有哪些方法?

2024年11月28日 阅读量:48

1. 脂质体法。中性脂质体用脂质膜包裹DNA,用脂质膜将DNA引入细胞膜。带正电的阳离子脂质体是不同的。DNA没有提前埋在脂质体中,而是自动将负电的DNA与带正电的脂质体结合,形成DNA-阳离子脂质体复合物,吸附到带负电的细胞膜表面,通过内吞进口细胞。脂质体法始于1987年,其出现大大提高了转染效率、稳定性和可重复性。阳离子脂质体细胞毒性较高,可能会干扰不同细胞的代谢。
2. 电穿孔法。对细胞进行短暂的高电场电脉冲处理,沿细胞膜的电压差会导致细胞膜暂时穿孔。DNA被认为通过孔扩散到细胞中。电脉冲和场强的优化对于成功的感染非常重要,因为场强过高,电脉冲时间过长,会不可逆地损伤细胞膜,裂解细胞。理论上,电穿孔法可用于各种细胞,不需要购买特殊试剂,但需要昂贵的电转仪。由于细胞死亡率高,每次转染都需要更多的细胞和DNA。每个细胞电转的条件都需要多次优化。
3. 病毒介导的感染。感染需要将目的基因克隆到特定的病毒系统中,然后在包装细胞包装后进行感染。其优点是感染效率特别高,特别是难以感染的原始细胞和活体细胞。缺点是病毒周期长,环节多,容易出错,成本高。
四、非脂质体转染 。最新的纳米聚合物转染试剂,如Entranster试剂、纳米材料、细胞毒性小、转染效率高,逐渐成为各大实验室的首选。

更多化工行情,请关注灵元素公众号
免责声明:此文内容为本网站刊发或转载企业宣传资讯,仅代表作者个人观点,与本网无关。仅供读者参考,并请自行核实相关内容。
上一篇: 细胞转染注意事项
下一篇: 细胞周期测定实验有哪些,怎么做?