RNAI是利用降解双链RNA的酶系统人工引入与目标RNA互补的序列，在细胞内形成双链RNA，诱发降解机制，使目标RNA降解，无法进一步翻译。
在转染过程中，有人担心DSRNA的稳定性相对于单链RNA！RNA怎么样？
在RNAI中，标准的非修改性SiRNA确实很容易降解，不仅在保存过程中，而且在感染过程中。对于SiRNA的降解，可以合成修改的双链SiRNA，以提高合成中的稳定性，并使用合成的SiRNA。
无论什么样的RNA实验，最基本的一点都是严格防止RNase！尽量不要被RNA酶污染。RNase可以通过高温变性和DEPC失活！
所以还是勤快点好！
对于感染，由于接触血清、培养基和细胞内酶的作用。此时，出现了良好的转染试剂作用。在血清中游离时，保护SiRNA免受培养基中酶和蛋白质的降解和吸附，进入细胞后不被溶酶体降解并释放到细胞质中。良好的感染策略不仅具有保护作用，而且集中SIRNA，不会将抗生素、过量蛋白质等细胞以外的其他成分，特别是有毒成分带入细胞，以避免细胞的有毒反应。毒性对RNAI实验有很大的影响。
根据您的试验，需要综合考虑是否使用siRNA或shRNA进行RNA干扰。
1.选择SiRNA的优缺点
选择SIRNA只能瞬时转染，作用周期短，但SIRNA操作相对简单，试验周期短，转染效率一般优于SIRNA，主要由SIRNA分子特性决定，SIRNA转染优化一般采用荧光标记SIRNA，在荧光倒置显微镜下观察荧光的强度和分布。荧光特性相对较弱。
2.选择shRNA的优缺点
选择shRNA可以瞬转或稳定转染，工作周期长，需要构建载体，操作稍复杂，测试周期长，转染效率与您的转染手段和细胞类型有关。通常使用GFP或LUC来检测转染效率。
根据您的试验需要，可以选择原代细胞和其他类型的细胞。无论是SiRNA还是ShRNA进行原代转染，都需要优化转染条件，特别是转染试剂的选择和转染手段。如果转染效率仍然相对较低，您可以选择使用流式细胞仪进行分选。
