细胞转染实验为什么不能加血清？

    传统的转染试剂具有一定的细胞毒性，在转染过程中不能在培养基中添加抗生素，因为它提高了细胞的渗透性。如阳离子脂质体。带正电的脂质体和带负电核酸的磷酸基团形成复合物，被细胞吞噬。血清中含有大量的蛋白质，在转染过程中，带负电的蛋白质会干扰阳离子脂质体对核酸的吸附，影响转染效率。此外，在使用脂质体等转染试剂时，由于含血清转染会将血清中的蛋白质带入细胞，导致细胞毒性，降低转染效率，因此无血清转染。这些转染试剂需要在转染前更换无血清培养基，转染后4-6h更换为有血清培养基，实际上是为了减少转染引起的细胞毒性。
不同的细胞和转染试剂需要不同的转染条件。最好在第一次实验前进行预实验，如：HeLa，293，CHO，COS7， MCF－7.HepG2和其他细胞是否添加血清对不同的细胞有不同的影响。有些细胞可以有血清，有些细胞会受到影响。因此，普通的感染试剂必须进行预试验和条件优化。
    感染后6小时左右，最好换液，换成血清培养基。一是普通感染试剂对细胞有毒作用，二是可以减少缺乏血清引起的细胞死亡。无血清转染是防止血清干扰的作用，转染后可及时添加。过早加入会导致未转染细胞的优势生长，过晚会导致更多细胞死亡。在1/5细胞变圆时，可以实时观察血清。
    目前市场上有一些改进的转染试剂，可以含有转染时的血清，如Entranster试剂，只浓缩包裹核酸，不会将血清带入细胞。Entranster采用血清转染，不需要在血清和无血清之间更换，增加工作量。同时，血清转染不仅不会引起细胞毒性，而且有利于维持细胞状态，提高转染效率。
    由于Entranster的内毒素和细胞毒性很低，转染复合物可以有效地在完全培养基中形成，因此整个转染过程可以在含有血清和抗生素的培养基中操作，无需更换培养基，极大地方便了转染操作！适用于各种真核细胞，包括干细胞、神经细胞、原代细胞等难以转染细胞的方法。
    细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动的影响。这将严重干扰相关研究数据，甚至影响研究结论。因此，选择高效方便的感染试剂是细胞感染成功的关键。