细胞复苏的步骤

真核细胞通常悬浮在带有血清和冷冻剂的培养基中，保存在-196°C 液氮中。如果是商业订购，通常储存在用干冰包裹的冷冻管中。因此，为了去除冷冻过程中的添加剂，必须在快速解冻后立即培养冷冻细胞，以获得最大的生存能力， 24 培养基应在小时后更换。

一、材料

• 培养基， 37’C 预热
• 培养瓶
• 装有70 ％乙醇的烧杯
• 1ml 、10ml 移液管、移液器和移液头

二、步骤

1. 将冻结细胞的管子放在37'C 水浴融化，快速摇晃， 管内的细胞在1分钟内融化。
2. 将熔化的管子浸入70 ％在乙醇烧杯中，整个实验在超净台进行。
3. 小心打开冷冻管，不要让乙醇浸泡在管内。
4. 将冷冻管中的细胞转移到培养瓶中，并立即添加预热培养基。
5. 盖上培养瓶的盖子，培养24 小时。
6. 用新的培养基代替旧的培养基。
7. 继续培养2~3 天或按说明书上的建议操作。

三、温馨提示

1.融化的细胞必须立即培养，如果没有时间培养，就保存在液氮中。

2.细胞通常被冻结为1 ml 将新的培养基添加到10毫升 。

3.融化冷冻细胞后，可以离心细胞，用新鲜的培养基重新悬浮细胞。这种做法只适用于对冷冻剂敏感的细胞，或者第二天因为某些原因无法更换新的培养基。