该方法常用于检测白细胞和巨噬细胞的趋化性，经改良后用于测定肿瘤细胞的运动性和侵袭性。Boyden 小房间由上下两个房间组成，两个房间由带微孔的滤膜隔开，也可以用鸡胚尿囊膜和人胚羊膜隔开。待测细胞放置在上室， 其运动性
通过测量滤膜上层与运动最远的细胞之间的距离来确定。细胞数、滤膜底部的细胞数或下室的另一个滤膜上的细胞数也可以计算在不同的滤膜平面上。上下两室均为生理盐水时， 细胞运动是随机运动。若上下两室均加入相同浓度的化学趋化剂或生长因子等， 可以观察到强化细胞的无定向运动。当两个房间的化学趋化剂有梯度时，这种方法可以观察细胞的定向运动。
(一)材料和设备
NIH/3T3无血清 上清液、Matrigel 胶、Boyden 小房间，棉签，甲醇。
(二)操作步骤
1. NIH/3T3上清制备无血清 NIH/3T3 细胞达80％汇合时，更换无血清培养液， 继续培养48小时。收集上清， －20℃保存(使用时按比例加20℃)�S) 。
2. 包被基底膜 将冻存于－70°C Matrigel冰箱 胶4°C 过夜，变成液体。用无血清培养液稀释Matrigel。 （终浓度为1 .2mg/ml )，冰浴混合均匀。把它和Boyden混合。 Matrigel加入了小房间上层的小房间 胶70μl ，放入37°在C培养箱中孵化4~5h， 使Matrigel 胶凝固。
3. 细胞接种 Matrigelel用无血清培养液清洗 胶1 第二，轻轻吸收多余的液体。用无血消化培养液清洗胰蛋白酶消化收集细胞3 次，含1�S 培养液重悬细胞，将细胞浓度调节到2.5×105个／ml。每孔加入200μl 细胞悬液(5×104个／下层小房间加500个孔)μl NIH无血清/3T3 上清液(再加20�S), 37℃ 孵化在培养箱中。
4. 结果统计 取出Transwelll 用PBS 洗2 第二，用棉签擦去基质胶和室内细胞， 甲醇固定20min， HE 染色，观察显微镜，随机选择10 视觉计数。
（三）小结
最早的计数运动细胞是200 将不同深度的肿瘤细胞数量移入过滤膜的倍光镜下。现在通常直接计算膜背面的细胞数作为细胞运动的指标。
