流体检测细胞周期的操作步骤
1. 细胞培养：
取对数生长期的细胞，按1×106cells/ ml在6孔板内接种1ml24孔板或2ml，进行所需处理(如添加药物)，特定时间后终止培养，进行下一步实验。
2. 细胞固定：
800rpm离心5min，收集细胞沉淀，弃上清，用预冷PBS洗涤两次，加入预冷75%乙醇，4℃固定4h以上。
3. 细胞染色：
1500rpm离心5min，弃上清，用3mlPBS洗涤一次，加入400ulCCAA溶液(PI染液，engreen），100ul RNase A（100ug/mL ），4℃避光孵化30min。
4. 流式分析：
用流式细胞仪检测标准程序，一般计数2~3万个细胞，结果用细胞周期和软件Modfit进行分析。
