在EDTA和SDS等去污剂存在下，用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提，可以得到哺乳动构基因组DNA，用此方法得到的DNA长度为100-150 kb，适用于构建基因组文库和 Southern分析。
通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子质量较大的DNA的琼脂糖凝胶电泳技术。
本实验在无液氮的条件下，制备鼠肝DNA，与有液氮条件下相比，产量和质量都有所下降。整个操作过程中，应尽量避免DNA酶的污染，特别注意动作温和，减少对DNA的机械损伤。
1、取0.2g鼠肝，用冰冷的生理盐水洗3次，然后置于2.0mL匀浆液中，用玻璃匀浆器匀浆至无明显组织块存在(冰浴操作，切勿将细胞破碎，可镜检观察)。
2、将组织细胞移至1.5ml离心管中，50000rpm离心30-60sec，(尽可能在低温下操作)，弃上清，若沉淀中血细胞较多，可再加入细胞体积的一倍匀浆液洗一次。
3、沉淀加0.8mL无菌水迅速吹散，分两管，再加0.4mL酵解液，翻转混匀(动作一定要轻)55℃水浴处理12-18 h；
4、沉淀加RNase至终浓度200µg／mL，37℃水浴1 h；
5、加入等体积酚／氯仿／异戊醇抽提一次，(慢慢旋转混匀，倾斜使两相接触面增大)。4℃、10min、10000rpm离心；
6、有时如果DNA含量过高，水相在下层，实验时应注意观察。用吸头移出含DNA的水相(注意勿吸出界面中蛋白沉淀)，加等体积氧仿／异戊醇，4℃、10 000rrpm离心10rain (若界面或水相中蛋白含量多，可重复1．6操作)。
7、用吸头小心吸出上层含DNA的水相，加1／10体积的NaAc，小心混匀(要充分)，再向每管中加入2.5倍体积的无水乙醇，-20℃ 过夜。
8、12 000rpm离心19min，弃上清，75％冷乙醇洗涤一次，12000rpm离心15min室温干燥(不要太干，否则DNA不易溶解)，加入适量TE缓冲液，存放于4℃，轻摇溶解过夜，即可得到实验动物基因组DNA。
9、电泳鉴定DNA，由于基因组DNA相对分子质量较大，用0.3％的琼脂糖凝胶电泳鉴定，先在底部铺一层1％的支持胶，凝固后再铺上一层0.3％琼脂糖凝胶，插上梳子(梳子不能碰到支持胶)。取1.5µL溶解的DNA、1µL上样缓冲液和35µl无菌水混匀后小心上样(可在另一孔加DNA相对分于质量标准)，观察基因组DNA大小，用溴化乙锭染色观察结果。
[注意事项]
1、操作过程尽量在低温下进行，避免DNA降解。
2、琼脂糖凝胶脆弱，应小心操作。
3、提取得到的基因组DNA应为单一条带，DNA降解可形成弥散带型。
