化学词典告诉你基因工程疫苗的优点和制备方法， 随着现代生物技术的快速发展，虽然基因工程疫苗研究尚未取得全面突破，但由于传统疫苗的缺陷和基因工程疫苗的潜在优势，基因工程疫苗逐渐成为疫苗研究的热点。
基因工程疫苗的优点
（1）将保护性抗原基因插入载体的能力，修改后的载体可以表达来自病原微生物的保护性抗原基因、细菌和病毒载体，可以产生具有活疫苗和灭活疫苗优势的疫苗。这类疫苗具有亚单位疫苗的安全性和活疫苗的有效性；
(2)易于大规模使用(喷雾或气雾)；
(3)生产成本相对较低，目前世界上几个研究机构正在生产特定的家禽疫苗载体。
此外，还有一些病毒需要分子生物技术来开发新的疫苗，包括：
(1)有不能或难以用常规法培养的病毒，如新城疫弱毒株在鸡胚成纤维细胞上生长不良；
(2)传染性喉气管炎疫苗等常规疫苗效果差或反应大；
(3)白血病、法氏囊病、马立克氏病等具有潜在致癌或免疫病理作用的疾病；
基因工程疫苗的制备方法
第一步是分离目的基因。获取目的DNA片段的方法主要有两种，一种是直接从细胞基因组中分离，另一种是人工合成。
第二步是将DNA片段和载体连接到体外进行重组，成为重组的DNA分子，并通过连接酶进行连接。
第三步是基因克隆，即将重组体DNA分子，引入适当的宿主细胞(大肠杆菌、酵母)增殖。根据所用载体的不同，可以选择转化（当质粒作为载体时，重组体DNA分子以这种方式进入感觉状宿主细胞以获得转化子菌落）、转染(λ噬菌体作为载体时，重组体DNA分子以这种方式进入宿主细胞，可以转染得到噬菌斑)、转导(λ由外源DNA组成的噬菌体DNA重组体DNA分子，它与噬菌体蛋白组装成具有感染力的噬菌体颗粒，即人工包装的噬菌体颗粒引入宿主细胞），并将重组体DNA分子引入宿主细胞。
第四步是筛选和识别目的基因克隆，即将目的基因细胞与大量携带重组体DNA分子的细胞分离。因为并不是所有的细胞都能获得重组体DNA分子，为了获得重组体DNA分子细胞的摄入，需要筛选，以区分与未摄入重组体DNA分子的细胞，并进一步识别。筛选含有重组体DNA分子细胞的方法通常是基于载体DNA和目的基因的遗传标记和分子特征，并结合受体细胞的基因表型。由于许多质粒具有抗生素和其他药物的抗性标志，在含有一定浓度抗生素的选择培养基中，重组体DNA分子很容易被摄入，因为抗生素抗性细胞也被识别出来。然而，药物筛选只是一个方面。根据它，只能判断质粒载体是否进入受体细胞，受体细胞是否摄入含有目的基因的重组体DNA分子。
第五步是基因表达，是指宿主细胞中外源DNA在大规模繁殖过程中的转录和翻译，表达产生的产物(蛋白质)，最好在细胞内分泌到细胞外而不分解。对细菌蛋白酶非常敏感的多肽或蛋白质形成后，通常会迅速降解。为了确保外源基因表达产物能够在不降解的情况下分泌到细胞外，外源基因通常可以插入载体的某些结构基因中。在这种情况下，表达产物是一种融合蛋白，它能抵抗内源蛋白酶的降解，并在细胞信号肽的指导下分泌到细胞外。
