孟加拉玫瑰红

孟加拉玫瑰红

CAS号:632-69-9
英文名:Acid Red 94
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化合物简介
Rose Bengal Sodium Salt is used in biological studies as potential for use as sensitizers in photodynamic and sonodynamic therapy by synthesizing Rose Bengal amphiphilic derivatives.
基本信息
编号系统
物化性质
安全信息
生产方法及用途
生产方法
方法一、重组TNFα的工艺过程细菌发酵 将工程菌接种于LB培养基,37℃震荡培养至A600nm=1,转至M9培养基,于42℃诱导4h。离心,收集菌体。用pH为8的磷酸盐缓冲液(PB,10mmol/L)悬浮菌体,并用超声破碎菌体,离心收集上清液,对PB透析,得TNFα粗品。工程菌[培养、发酵]→[37℃、42℃]发酵菌体[10mmol/L PB]→[pH8]TNFα粗品DEAE-Sepharose FF 离子交换柱层析 离子交换柱用PB平衡,加TNFα粗品,用PB洗柱,再加7
5 mmol/L NaCl洗脱,收集各峰,测TNFα活性。TNFα粗品[DEAE-Sepharose FF离子柱]→[7
5 mmol/L NaCl]TNFα活性组分IQ-Sepharose FF离子交换柱层析 离子交换柱用pH 8、2
0 mmol/LTris-HCl缓冲液平衡,然后加TNFα活性组分I,用8
0 mmol/L NaCl洗脱,收集各峰,测TNFα活性,得TNFα活性组分II。TNFα活性组分I[Q-Sepharose FF离子柱]→[8
0 mmol/L NaCl]TNFα活性组分IICM-Sepharose FF离子交换柱层析 离子交换柱用pH为6的10mmol/L PB平衡,加TNFα活性组分II,再依次用该PB液、PB液加200mmol/L NaCl及PB液加60
0 mmol/L NaCl分步洗脱,收集各洗脱液,测TNFα活性,即得TNFα纯品(在4℃时,通过三次常压离子交换,电泳表明:PB液加60
0 mmol/L NaCl的洗脱峰为TNFα单一条带,可得TNFα纯品)。TNFα活性组分II[CM-Sepharose FF离子柱]→[PB、200及600mmol/L NaCl]TNFα纯品
方法二、对合成的TNFα突变改造突变改造 用多位点突变引物和PCR方法对合成的TNFα基因突变改造,使其第二位精氨酸密码子CGT变为赖氨酸密码子AAA,即得突变基因TNF-K2。TNFα基因[多位点突变引物、PCR方法]→TNF-K2转化、重组 将TNF-K2插入载体pSB-92的PL启动子下游,转化E.coliJM103,经酶切鉴定筛选转化子,得重组质粒pSB-TNF-K2。TNF-K2[pSB-92]→pSB-TNF-K2培养、诱导 将pSB-TNF-K2于30℃培养至对数生长期,于42℃诱导4h,即得突变体[Lys2]TNFα,其分子量为17kD,比活性为6.8×107U/mg 蛋白,是一种可溶性蛋白质。pSB-TNF-K2[30℃, 42℃, 4h]→[Lys2]TNFα.
用途
用作银量法的吸附指示剂和生物染色剂。主要用于抗肿瘤和抗病毒综合征的治疗。