western-blot实验注意事项

• 滤纸、胶水和膜之间的大小通常是滤纸>=膜>=胶。
• 滤纸、胶水、膜之间不得有气泡，气泡会引起短路。
• 由于DEPF膜的疏水性，膜必须先完全浸泡在甲醇中。此外，在以后的操作中，膜必须随时保持湿润（干膜法除外）。
• 滤纸可以重复使用。上滤纸（膜）吸附了大量转移的蛋白质，因此上滤纸和下滤纸不能混淆。如果无法区分，可以更换胶滤纸。
• 转移时间一般为1.5 小时，( 1ma-2ma/cm2 gel)，转移时间和电流大小可根据分子量调整。
• 灌胶时尽量均匀，否则可能会出现气泡。
• 为避免低信号，最好选择高灵敏度的发光液，如engrenenenlight发光液等。