由于心血管系统发病率高，死亡率高，严重威胁人类生命，随着心血管疾病研究的深入，以体外培养的血管平滑肌细胞为研究模型，广泛应用于心血管疾病，特别是动脉粥样硬化研究。
(一)材料和设备
1. 设备超净工作台、离心机、水浴锅CO2 培养箱、－70 ℃ 冰箱，－20 °C:冰箱。
2. 无菌材料培养皿、止血钳、15ml 离心管、刻度吸管、弯头吸管、T25细胞培养瓶、高糖DMEM 培养液、胎牛血清、青／链霉素、D-Hanks 0.1%胰蛋白酶，2kg 成年兔(大耳白)胸主动脉。
(二)操作步骤
1. 胸主动脉在无菌条件下取出，D-Hanks 溶液洗净血污，清除外膜杂组织，然后移入小培养皿中，使用含有双倍双抗的D-Hanks 溶液洗2 次。
2 . 用剪刀切成单片，加0. 1％37℃胰蛋白酶 消化20min , 在此期间，每5min摇晃1次 次。
3 . 弃悬液， 将组织切割到1mm3， 将青霉素瓶移入，然后吸入D-Hanks 溶液洗2~3 次。
4. 将组织块移入T25 细胞培养瓶，用弯头吸管将组织块轻轻剥离成单块，均匀贴在瓶壁上，然后将贴有组织块的培养瓶移入培养箱，翻转倒置4~6h ,至组织块贴牢。
5 . 加入6~8ml 含20％胎牛血清DMEM 培养液，于37°C 、5% CO2 在培养箱中培养。
6. 3~7d 镜下观察后，细胞会在组织块周围生长，细胞生长后可以看到“生长晕”。
7 . 在原有的培养过程中， 应保证每3d 换1 细胞生长到7~10d 可以第一次传代。以后每3~4d。 传代1 第二，按常规l : 3 操作传代方法。
(三)细胞鉴定
表达平滑肌细胞的特征αSMA, 细胞免疫化学染色呈阳性。
（四）小结
请注意，血管外膜应尽可能剥离，以避免与纤维细胞混合。这种方法培养的平滑肌细胞纯度可达99%。如果培养条件好，代代相传， 平滑的肌细胞可以代代替23 代。
