1. 转染试剂
转染应特别注意转染试剂应确认无RNase污染，并尽量避免与质粒DNA转染混合——即使试剂本身与DNA和RNA转染兼容，由于RNA和DNA尺寸不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，因此RNA专用转染试剂会更好。例如，Entranster-R4万.
2. RNA转染时RNA的用量
RNA转染的剂量必须参考RNA转染试剂的说明，因为RNA和转染试剂的比例决定了转染复合物的结构和净电荷，以及它们是否容易被细胞膜吸附和吞咽。没有RNA是不好的，太有毒的问题。
3. RNA本身的结构
除了操作，RNA本身的结构也对感染有一定的影响。哺乳动物的MRNA分子有5端帽子结构和3端PolyA尾巴，除了IRES(internalribosomal entry site)这些结构可能有助于提高MRNA的稳定性，也可能有助于将核糖体结合到MRNA上进行翻译。
