1)实验条件是否良好:不同的质粒、不同的细胞和定量的准确性会导致在某些情况下转移不在优化条件下。在这种情况下,有必要优化质粒转染试剂的比例。此外,还可以选择更合适的转染试剂,如Entranster试剂。
2)抑制剂:不要在DNA-转染试剂复合物培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素、透明质酸、硫酸葡聚糖或其它硫酸蛋白多糖。
3) 细胞状态及融合度:生长旺盛的细胞转染效果较好,转染时细胞密度应至少70%。
4)DNA的纯度和数量:确保质粒OD值A260/A280 在1.8~2.0之间。DNA量不宜过高,单独的DNA也会对细胞生长产生基本影响。


