细菌生长曲线的测定及其意义

2024年12月04日 阅读量:92

细菌生长曲线是将少量细菌接种到一定体积、合适的新鲜培养基中,在合适的条件下培养,定期测量培养液中的细菌量,以细菌量对数为纵坐标,生长时间为横坐标,绘制曲线。

一、 细菌生长曲线的测定方法

1、菌种培养:取1个大肠杆菌斜面菌种,无菌操作取1个环菌苔藓,接入肉膏 蛋白质培养液(LB)静止训练12–14h,备用。

2、在200毫升三角瓶中,制备LB培养基100毫升备用。

3、标记:取11根无菌试管,用记号笔分别注明培养时间,即0、1.5、3、4、 6、8、10、12、14、16和20h。

4、接种:用5ml无菌吸管吸收5ml大肠杆菌培养液(培养12~14h),转入100ml 在LB液的三角形瓶中,混合均匀后,将5ml混合物放入上述标记的11个无菌试管中。

5、孵化:180rpm摇床在37℃震荡

6、检测:按时取出0:、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、在600纳米波长处测量菌液浓度(OD值)20h试管

7、绘制曲线:绘制一组OD值及其相应的培养时间,以绘制细菌的生长曲线。

二、细菌生长曲线的测量意义

细菌生长曲线反映了单细胞微生物在一定环境条件下培养液体时所表现出的群体生长规律。大多数细菌的繁殖速度非常快,在适当的条件下,大肠杆菌细胞在一定时期内每20分钟分裂一次。生长曲线一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰退期。由于菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同,这四个时期的长度发生了变化。因此,通过测量微生物的生长曲线,可以了解细菌的生长规律,对科研和生产具有重要的指导意义。

微生物OD值是反映菌体生长状态的指标,OD是反映菌体生长状态的指标optical delnsity(光密度)的缩写表示被检测物吸收的光密度。通常是400~700nm 都是微生物测定的范围,505nm测菌丝菌体,560nm测酵母,600nm测细菌。

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