实验过程中如何进行无菌操作?

2023年03月08日 阅读量:141

一、倒灌

左手接收容器,右手接收液体容器。

用火烧开接收容器的开口,并在火焰旁保持一定的角度。

用火烧开供液容器的开口,并在火焰上烧1~2秒,不要烧液体。

在距接收容器上方2英寸的地方放置供液容器,使其成为适当的夹角。

倾斜瓶子,倒出溶液。

倒入后用火分别烧两个瓶口。

由于倒淮比移液更容易造成污染,所以倒灌只能在转移大量溶液时使用。


二、过滤除菌

注射过滤器过滤少量溶液。

只有撕开过滤器的上包装,即较粗的一端,才能插入注射器的顶部。

将注射器从包装中取出,拉出推杆,放在干净的台面上。

取下注射器顶部的保护头,立即插入过滤器,注意不要取出过滤器的包装,将安装好的设备放在干净的台面上。

打开灭菌管的盖子,放在试管架上。

将过滤器从包装中取出,放入试管中,握住注射器,保持垂直状态。

将液体倒入注射器中,插入推杆,用力但要慢慢地将液体流过滤器,然后流入试管。

试管盖好,做好标签,把注射器扔进装有生物危害的尖锐垃圾箱。


三、材料

一次性0.2μm的滤器。

注射器的相应体积(1毫升、2毫升、5ml、使用灭菌或一次性注射器,10ml或20ml,50ml注射器徒手操作困难)。

采用无菌管作为接收容器。

试管架


大体积溶液用杯状过滤器过滤。

一、材料

一次性0.2μm的滤器。

铁架台或架子放置过滤器。

安装过滤后的溶液采用无菌试剂瓶

家用真空泵是实验台上最常用的设备,它是由水或泵驱动的。

将冲击器和真空泵与软管连接,用夹子将过滤器固定在架子上,保持垂直稳定。

将溶液倒入过滤器中,当溶液体积较大时,可以将液体分批倒入过滤器中。

在过滤器的盖子上,慢慢打开真空泵,溶液会慢慢从过滤器中取出。有些过滤器可以配备特菌试剂瓶,这样过滤后的溶液可以直接存放在试剂瓶中。

关掉真空泵,等一会儿。

将真空泵的管子从过滤器上拔下,立即将过滤液倒入无菌试剂瓶中保存。假如容器是过滤装置的一部分,只需先盖上容器的盖子。

做好试剂瓶上的标签,注明已经过滤除菌。(FS),弃掉滤器。


二、抽气操作

使用抽气移出液体的操作与使用移液器的操作非常相似,工作区间应清理干净,但需要多一个容器来临时放置用过的移液管或吸管。

打开移液管巴氏管的包装,在抽气瓶上安装一个。

用左手握住吸管,插入右手握住的橡皮管。

用手握住插入橡皮管的吸管部分。

如果是玻璃吸管用火稍微烧一下。

打开真空泵。

打开试管或吸液容器,用右手剩下的两根手指夹住盖子,将试管或容器保持在45℃。

试管口用火焰燃烧。

只要将吸管头插入液面以下,并随着液面的下降而下降。

靠近底部时,稍微抬起一点吸管,使吸管头在沉淀上方附近慢慢移动,直至吸完为止,但不要碰到沉淀。

将吸管放入事先准备好的容器中进行处理。

烧掉容器口,盖上。

垂直放置容器或试管,确认液体已经吸收。

关闭真空泵,取下吸管。

吸气作业中使用传染性物质时,必须在吸气瓶和真空胃之间连接一个装满水的过滤器,以防止这些物质进入真空装置。当真空度降低时,意味着过滤器已经浸湿,必须更换,因此备用过滤器应提前准备好。

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