麟得EasyPrep样品制备研磨仪用于透皮实验应用案例

2022年03月04日 阅读量:64

生物医药研究具有大量的样品检测需求,此过程离不开检测前的样品处理环节,今天灵元素给大家分享样品制备研磨仪在透皮实验方面的应用案例,一方面提供给大家该设备的操作方法,另一方面也进一步加深对其性能的认识。

 

样品制备研磨的原理

根据用途的不同,样品制备研磨仪可能有不同的叫法,有土壤前处理设备,有农残前处理仪等,而麟得EasyPrep样品制备研磨仪是针对疑难样品的前处理设备。可以处理动植物组织,水及空气等环境样品,肉类食品,动物皮肤等等。它使用“字形”运动模式配合研磨介质,通过物理方法帮助快速、高效破碎样本,释放内容物,用于后续的核酸提取、免疫检测、化学成分分析等,整个过程迅速,产热少,无接触、没有外源污染物引入,不产生交叉污染。

 

本例是用小香猪的猪皮来测试EasyPrep仪器的各种性能。为了让实验更通俗易懂,先进行几个名词解释。

 

透皮吸收指数

化妆品透皮吸收指的是化妆品中的功能性成分按产品的有效性作用于皮肤表面或进入表皮真皮等不同肤层, 并在该部位积聚和发挥作用的过程。化妆品功效成分的透皮吸收并不需要透过皮肤进入体循环,这是它与药物的主要区别。

例如,防晒产品中的UV吸收剂应滞留在皮肤表面,起吸收和反射紫外线的作用;美白产品中的美白剂常作用于表皮中的基底层,阻断黑色素的产生;而抗衰老产品中的功效成分则常作用于真皮层的成纤维细胞,使皮肤富有弹性。

 

皮肤的结构

皮肤分表皮、真皮及皮下组织三部分,其中,表皮由外向内又分为角质层、透明层、颗粒层、有棘层和基底层五层。表皮中除角质层外,都是由活性细胞组成。角质层是表皮的最外面一层,由4-8层已死亡的扁平层状无核细胞组成。角质层可保护皮肤,防止体内组织液外渗,限制水、脂质或化妆品成分等物质通过,保持皮肤柔韧,是皮肤健美的决定层。

 

透皮的途径

透皮途径主要有角质层、毛囊和汗管,其中后两条通路经常被称为“旁路”,因为皮肤附属器与整个皮肤表面积相比,仅占1%以下,在大多数情况下不是主要吸收途径,但大分子物质及离子型物质难以通过富含类脂的角质层,可能经由这些途径进入皮肤。一般认为,透皮渗透的主要屏障来自角质层。有研究表明,在离体透皮实验中,将皮肤角质层剥除后,物质的渗透性可增加数十倍甚至数百倍。分子质量小的药物,能向吸收的最大屏障角质层中扩散,尽管数量上有限,但其扩散速度越往里越大。在角质层中的扩散途径有细胞间隙扩散和细胞膜扩散两种。一般认为脂溶性、非极性物质易通过细胞间隙的脂质双分子层扩散,而水溶性和极性物质易通过角质细胞扩散。

 

透皮的机理

关于透皮吸收的机理有扩散理论、渗透压理论、水合理论和相似相溶理论。

扩散模型是长期以来用于说明药物经皮肤渗透的主要模型,通过该模型,使用表面活性剂、水杨酸等使角质层厚度变薄;使药物在膏体中的亲和力小于在皮肤中的亲和力;扩大汗腺和毛囊开口,溶解皮脂腺管内皮脂等都可以增加有效成分的渗透。

研究化妆品中有效成分在皮肤靶部位的吸收、分布过程,对化妆品有效成分的研发具有重要的指导意义。透皮吸收检测方法主要是用来检测功效成分或有害成分的透皮吸收速率、渗透量等,为产品的开发和改进提供依据。其次,透皮吸收检测方法对促渗剂的选用及经皮传输系统的开发也有着巨大价值。

本应用案例是使用LDB-100 EasyPrep样品制备仪配合研磨珠对经过透皮实验处理的香乳猪皮进行研磨破碎,释放渗透进皮肤的化妆品有效成分,进行后续的分析测定。进而对化妆品的护肤功效进行评估。

 

透皮实验流程

本应用案例的主要目的是从经过化妆品透皮实验的猪皮中释放萃取渗透到皮肤内的化妆品成分用于后续的分析检测。

实验目的:研究化妆品在不同皮肤结构中的分布情况。

实验过程:采用Franz扩散池法,以乳猪皮为载体,将其固定在Franz扩散池的供给室和接收室之间,将扩散池固定于透皮吸收扩散仪中,化妆品涂抹于乳猪皮表面。作用若干小时后取样用EasyPrep样品制备研磨仪对猪皮进行研磨处理。得到的匀浆液再进行进一步的液相色谱检测,以确定有效成分的透皮吸收情况。具体流程如下:


 

40mg经过处理的猪皮,剪成2mm的长条状,将样品加入的2mm离心管,加入一颗研磨珠,1ml90%乙腈


 

将样品管放入EasyPrep样品制备研磨仪,旋转压盖按钮至听到咔咔响即可。


 

盖好盖子,将两边的金属扣子扣好;设置程序,点击开始。


 

研磨结束,打开研磨仪的盖子,取出样品。


 

结果展示:管中经过处理的样品继续进行后续的也相色谱检测,以确定有效成分的渗透情况。



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