什么是己糖激酶法、己糖激酶法原理以及过程

2025年03月11日 阅读量:194

元素百科信息频道:本文主要介绍自糖激酶法的原理和自糖激酶法的过程。自糖激酶(hexokinase)是别构酶,专一性不强,受葡萄糖-6-磷酸和ADP的抑制,KM小, 亲和力强,可以作用于多种六碳糖。

糖激酶法原理

葡萄糖与ATP发生磷酸化反应,在自糖激酶催化下产生葡萄糖-6-磷酸化(G-6-P)与ADP相关。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在催化下脱氢,产生6-磷酸葡萄糖酸内酯,将NADP还原为NADPH。

根据反应方程,NADPH的产生率与葡萄糖浓度成正比,在340nm的波长下监测吸光率,计算血清中的葡萄糖浓度。

糖激酶法的过程

酶馄饨试剂的成分和浓度

按试剂盒说明书复溶后,混合制成酶试剂,放入棕色瓶中,放入冰箱保存约7天。

2.5mmol/L葡萄糖标准应用液

手工操作

1.速率法测定(以半自动分析仪为例)

(1)主要参数

(2)加样;37℃预温酶混合试剂10000μ1,加血清20μ1.立即吸入自动分析仪,监测吸光率的上升速率(△A/min)。

(3)计算

2.终点法测定:取16mmxl00mm试管,按下表编号和操作。

上述管道完全混合,在37℃水浴中,准确放置10min,分光光度计波长340nm、比色杯光径10mm,用蒸馏水调零,读取各管的吸光度(Au、Ac、As、AB)。

计 算

参考值

空腹血清葡萄糖为3.89-6.1lmmol/L(70一110mg/dl)。

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