化学词典告诉你超滤离心管的使用方法和应用。超滤离心管已广泛应用于生物科学领域，特别是在生物化学和分子生物学研究领域。超滤离心管，超滤膜由聚醚啉、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart四种材料制成，可根据不同要求灵活选择。
使用超滤离心管的方法
（1）选择合适的超滤管。通常，分子量不应大于目标蛋白质分子量的1/3。例如，如果目标蛋白质分子量为35kda，则可选择10kda截留分子量的超滤管。如果目标蛋白质分子量约为10kd，则可使用截留分子量为3kd的超滤管。仔细阅读说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受性。
(2)新买的超滤干燥，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱预冷几分钟。然后倒出水，加入蛋白液，以不超过管顶的白线为准。操作要轻。加入蛋白液前，需要将超滤管插入冰中预冷。
（3）平衡。质量和重心都要平衡。注意速度和加速度不要太快，否则会直接损坏超滤膜。离心超滤(离心机预冷至4度)开始。转换成g后，不同离心机的转速rpm会有所不同。将离心机的加速度调整到最低档，以降低对膜的压力。请注意，离心机必须等到离心机达到目的速度，否则离心机出现问题，不能第一次处理。根据说明调整膜和转轴的方向(角转离心机的情况是膜垂直于轴)。在实际使用中，一般速度低于说明书，可延长离心管的使用寿命。
(4)当浓缩到剩余1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看是否变蓝，判断超滤管是否漏蛋白。若管道泄漏，将上层和流穿重新倒入新管中，开始超滤。要准确判断管道是否泄漏，使用5mgmlBSA离心10min，然后取流穿、运行蛋白胶或Bradford粗测，继续添加剩余蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白质加热），直到所有浓缩液完成。注意蛋白质沉淀是否发生在离心过程中，导致管道堵塞。如果发生沉淀，需要确定沉淀的具体原因，是蛋白质浓度过高还是buffer不合适；前者可以通过多根超滤管同时过滤来降低浓度。后者的方法是更换不同的缓冲溶液，直到蛋白质不沉淀。
(5)前几步用于浓缩蛋白质。如果要更换buffer，在总蛋白液浓缩到1ml左右时，轻轻添加新的buffer(经0.22um超滤膜超滤)，然后浓缩到1ml左右，连续三次。最后一次浓缩的最终体积取决于所需的蛋白质浓度，一般不超过500ul，也浓缩到200ul以内。按每次至少10倍的体积浓缩计算，三次达到1000倍以上，基本可以达到换buffer的目的。
超滤离心管的应用
1、可直接使用新购买的超滤离心管，无需进行其他处理。
2、超滤离心管不能高温高压灭菌。
3、浓缩采用超滤离心管。
4、脱盐。
5、换buffer
6、具有部分纯化功能的效果。
