化学词典告诉你鬼笔环肽的配置和注意事项。鬼笔环肽(phalloidin 鬼笔鹅膏素),从毒性蘑菇中分离出来的剧毒生物碱,C35H48N8O11S。无色,细针状结晶,从毒蘑菇鬼笔鹅膏开始(Amanita phalloides)有毒的环状七肽。

制备鬼笔环肽
0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇(也可溶于DMSO或无水乙醇),可在-20度避光条件下长期保存,工作液浓度为5ug/ml,用储存液和生理盐水PBS稀释20倍即可。
染色程序:
PBS生理盐水清洗细胞2次,每次10分钟;
3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;
加5ug/mlFITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间较短,生理盐水PBS清洗细胞2次;
DAPI或hoechst33258染细胞核10分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;
吸收多余水分,加入荧光封片液(中性或碱性缓冲液加等量甘油),盖上玻片,在荧光或共聚焦显微镜下观察。
鬼笔环肽注意事项
鬼笔环肽分子量小,容易通过细胞,不需要冷丙酮和TRITON X-100处理。
药品价格昂贵,0.1mg价格接近2000元,节约使用。
毒性大,戴手套操作。

