固相萃取的特点是什么,固相萃取方法如何选择

2025年05月08日 阅读量:142

化学词典告诉你固相提取方法的选择。固相提取本质上是一种液相色谱分离,其主要分离方式与液相色谱相同,可分为正相(吸附剂极性大于洗脱液极性)、相反(吸附剂极性小于洗脱液极性)、离子交换和吸附。固相提取中使用的吸附剂与液相色谱中常用的固定剂相同,但粒度不同。

正相固相提取的特点

固相提取是一种应用广泛、越来越流行的样品预处理技术。SPE利用固体吸附剂吸附液体样品中的目标化合物,与样品基体和干扰化合物分离,然后用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和丰富目标化合物的目的。由于其安全、回收率高、重现性好、操作简单、速度快、应用范围广、易于实现自动化操作等特点。

固相提取方法的选择

固相提取技术的分离模式有很多种。具体方法主要取决于待处理样品的相对分子质量(Mr)样品的性质。

1.选择固相提取时应考虑的问题:(1)待测物体的化学性质:功能基团、离子化、水溶性或脂溶性。(2)基质性质:pH值、离子强度、水或有机溶剂。(3)类似干扰物的性质。(4)样品中待测物体的浓度。(5)分析的检测限制和灵敏度。(6)待测物体是否需要富集和纯化。2.固定相的选择(固定相是根据相似相溶的原则选择的):SPE的固定相是样品分离和纯化的关键。由于固定与SPE的重复性、回收率、灵敏度和特异性有关,SPE的吸附剂一直是人们关注的焦点。自SPE发明以来,聚合树脂的样品污染一直令人痛心。1978年,Waters公司发明了C18键合硅胶制成一次性小柱(Sep-pakR),可靠性和稳定性高,已广泛应用于临床生化检查。所有可用于HPLC的吸附剂都可用于SPE,包括近年来药物滥用检测的“designerphase”。吸附剂的选择不仅要考虑样品各成分与固定相的亲和力、待测物体和洗脱剂的作用力,还要考虑样品的通用性。就目前的化学键合相而言,非极性键合相有C1、C2、C4、C6、C8、环己烷基、苯基、二苯基、C18等。极性和弱离子交换包括氰基、二醇基、氨基、伯胺/仲胺基、丁酸基;强离子交换包括丙磺酸基、苯磺酸基、季铵基等。吸附树脂包括:XAD-2、GDX、X-5。具有选择性的苯基磺酸可用于分离共平面连位羟基结构分子。对于生物样品,大部分溶解在水性物质中,待测物质被离子化,非极性或弱极性分析物用R-P提取,有机溶剂中的极性物质用正相提取。吸附剂的用量必须保证所有待测物质都能从样品中有效吸附,不保留基质成分。增加吸附剂的用量可以增加吸附能力,但也可以增加洗脱量,稀释待测物质,给干燥和定量带来困难。因此,在实现有效吸附的前提下,使用最少量的吸附剂。

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