化学词典告诉您色谱柱的安装和使用注意事项。什么是色谱柱？色谱柱是指填充固定相用于分离混合物的柱管。柱管、压帽、夹套（密封环）、筛板(滤片)、接头、螺钉等。色谱柱两端的柱接头配有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20µm(5~10µm)，目的是防止填料泄漏，这取决于填料的粒度。
安装色谱柱
⑴、色谱仪的泵和管道必须用过滤和脱气的流相(不含缓冲盐)彻底冲洗，使系统不含气泡。⑵、根据色谱柱上标注的流动相流向，色谱柱入口与泵端管道连接，柱出口不连接。 ⑶、将泵的流速设置为0.1mL/min或更低，流速缓慢上升到正常流速（t>5min）。⑷、当溶剂从色谱柱出口端自由流出时，将流速设置为0，并将柱出口连接到检测器端的管道上。⑸、用10－流动相30倍，色谱柱正常流速平衡。⑹、氨基柱和氰基柱可在正相环境中使用，也可在反相环境中工作。当需要从反相变为正相或正相变为反相时，需要使用20－作为过渡溶剂冲洗系统，30倍柱体积的THF容易堵塞泵的单向阀，造成压力异常。
使用色谱柱的注意事项
①、流动相：
a、溶剂必须为HPLC级，试剂应尽可能高纯度；
b、不与固定相发生化学反应，粘度小，对样品溶解度合适，要求k在1～10范围内(可用范围)或2～5(最佳范围)，k值过小，不利于分离；k值过大，样品可能会在流相中沉淀；c、使用流相前必须过滤脱气；d、确保溶剂间相互混溶；
e、流相必须与检测器相匹配，如果使用紫外线检测器，则不能选择截止波长大于检测波长的溶剂。
②、固定相：a、流动相的pH值应保持在2.0－8.0之间(除非有特殊说明)；b、必要时可使用预饱和柱和保护柱；c、使用氨基柱时，流动相和样品中应尽量避免含醛和酮类物质。目前的反相色谱柱填料可分为以下三种：⒈硅胶柱：柱效高，机械强度高，但对pH敏感，pH值低(<2.0)会水解键合相(去除键合功能集团)；高pH值（>8.0)硅胶溶解。若流动相pH值接近2.0或8.0，则需使用预饱和柱。
⒉有机聚合物填料：在宽pH范围内稳定，残留硅羟基效应小；但柱效低，机械强度低，可在不同溶剂中缩水或膨胀。在应用过程中，压力不得超过其最大限度，甲醇、异丙醇、乙醇等流动有机溶剂的含量不得超过10％。⒊有机－无机杂化颗粒填料：新开发的新型填料由两种高纯度单体（有机聚合物和无机硅烷）合成。这些填料有机地结合了硅胶填料和有机聚合物填料的优点。柱效高、机械强度高、稳定性好、pH范围宽，特别是表面和颗粒内的硅羟基大多被有效屏蔽，使其具有很好的碱性物质保留性能。
