薄层色谱广泛应用于物质识别、杂质检测和含量测定,也是有机合成中跟踪反应过程的有效手段。薄层色谱被称为有机合成在跟踪反应过程中,“眼睛”、高灵敏度、稳定斑点颜色的显色方法非常重要。
紫外线照射法、碘蒸气法、荧光试剂法、硫酸溶液显色法是检测一般有机化合物的常用方法。
(1)紫外照射法
紫外线照射法的显色原理是待测物质有紫外线吸收。干燥的薄层板采用紫外线照射,板上的有机物会吸收紫外线,从而在板上出现相应的色点。
优点:该方法操作方便,不会损坏样品。
(2)碘蒸气法
碘蒸气法的显色原理是大多数有机物遇碘蒸气会变黄-黄棕色斑点。操作方法如下:先在封闭缸内放入少许碘晶体,然后将薄层板放入封闭缸内。大多数有机化合物吸附碘蒸汽后会显示不同程度的黄褐色(棕色)斑点。然后将薄层板放入碘蒸汽中 5min( 或喷 5% 碘的氯仿溶液) ,取出后空气中所有过量碘蒸气挥发后,喷洒 1% 淀粉水溶液,斑点变成蓝色。
优点:薄层色谱的定性和定量检测非常直观、准确、通用。它不会改变有机化合物的性质,与紫外线结合的灵敏度高于这两种方法。
(3)荧光试剂法
荧光试剂法的原理是其自身的无荧光物质可以使荧光试剂荧光淬灭形成暗点。操作方法是:用少量荧光材料制成的硅胶板 254 nm 紫外线灯,整个薄层硅胶板呈黄绿色荧光,由于吸收了部分紫外线照射在斑点位置,被测物质呈现出各种颜色。
优点:能创造荧光背景,能使原紫外线下无荧光物质被识别,有荧光物质更加明显。
(4)硫酸溶液显色法
硫酸显色的原理是浓硫酸碳化有机物 。操作方法:喷洒 5% 浓硫酸乙醇溶液,或 15% 浓硫酸正丁醇溶液在空气中干燥 15min,再热到 110 直到颜色出现。
优点:对绝大多数有机物有效,是有机合成反应监测的通用显色法。
以上四种常见的显色方法具有灵敏度高、斑点颜色稳定、斑点与背景对比度好等优点,受到有机合成工作者的青睐。


